外部照射光を必要としない発光タンパク質
- 「ナノ ランタン: Nano lantern（NL）」は、ルシフェラーゼと蛍光タンパク質を細胞内や核内等で物理的に隣接させ、ルシフェラーゼによる化学発光を光源とすることで、蛍光タンパク質の観察を可能にするリサーチツールです。
- 一般的に細胞内でタンパク質の局在や動態を可視化・解析する蛍光タンパク質の観察には、外部光源が必要です。しかし、外部光源の使用により、細胞へのダメージや自家蛍光によって観察時に悪影響を及ぼすことがあります。NLは、外部光源を必要としないため、照射光の影響を回避できます。
- Five colour variants of bright luminescent protein for real-time multicolour bioimaging.
Suzuki K, Kimura T, Shinoda H, Bai G, Daniels MJ, Arai Y, Nakano M, Nagai T.
Nat. Commun. 7: 13718 (2016). PMID 27966527.
単一分子も検出できる！高光度マルチカラー化学発光タンパク質を開発 (大阪大学、2016年12月14日)Catalog no. Name of resource Descriptiion RDB19870 ReNL/pcDNA3 Vector of red enhanced-nanolantern, a chemiluminescent protein, for mammalian expression. RDB19871 OeNL/pcDNA3 Vector of orange enhanced-nanolantern, a chemiluminescent protein, for mammalian expression. RDB19872 YeNL/pcDNA3 Vector of yellow enhanced-nanolantern, a chemiluminescent protein, for mammalian expression. RDB19874 CeNL/pcDNA3 Vector of cyan enhanced-nanolantern, a chemiluminescent protein, for mammalian expression. - Expanded palette of Nano-lanterns for real-time multicolor luminescence imaging.
Takai A, Nakano M, Saito K, Haruno R, Watanabe TM, Ohyanagi T, Jin T, Okada Y, Nagai T.
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 112 (14): 4352-4356 (2015). PMID 25831507.
蛍光タンパク質には、青緑色、黄緑色、橙色の3色があり、理化学研究所生命機能科学研究センターの岡田康志先生、高井啓先生、大阪大学産業科学研究所の永井健治先生等によって開発されました
肉眼でも観察できる！従来の20倍光るタンパク質を開発 (大阪大学、2015年3月24日)
| Nano-lantern | Yellow | Cyan | Orange |
|---|---|---|---|
| N-ter | pYNL-N1 (RDB13323) | pCNL-N1 (RDB13325) | pONL-N1 (RDB13327) |
| C-ter | pYNL-C1 (RDB13324) | pCNL-C1 (RDB13326) | pONL-C1 (RDB13328) |
- 全51種類のリソースには、論文で報告されたES細胞の多能性維持に必要なNanog、Oct4、Sox2の各プロモーターに黄緑色、青緑色、橙色の各NLを連結・発現させることで、同一細胞上でそれぞれの遺伝子の発現の同時観察を可能にしたもの、さらには細胞内の微細構造、例えばNuclei、Lysosome、Cytoskeletonなどを構成するタンパク質に連結した「NL」も含みます。
| Location | Yellow | Cyan | Orange | Tag |
|---|---|---|---|---|
| beta-Tubulin | pYNL-N1_TUBB5 (RDB13338) | pCNL-N1_TUBB5 (RDB13339) | pONL-N1_TUBB5 (RDB13340) | mouse beta-tubulin class V |
| Cytoskeleton and focal adhesion | pYNL-N1_vinculin (RDB13350) | pCNL-N1_vinculin (RDB13351) | pONL-N1_vinculin (RDB13352) | chicken vinculin |
| F-actin | pYNL-N1_ITPKA (RDB13347) | pCNL-N1_ITPKA (RDB13348) | pONL-N1_ITPKA (RDB13349) | rat inositol triphosphate 3-kinase A |
| Focal adhesions | pYNL-N1_zyxin (RDB13341) | pCNL-N1_zyxin (RDB13342) | pONL-N1_zyxin (RDB13343) | mouse zyxin |
| Golgi apparatus | pYNL-N1_Golgi (RDB13353) | pCNL-N1_Golgi (RDB13354) | pONL-N1_Golgi (RDB13355) | N-terminal 81 amino acids of human beta 1,4-galactosyltransferase |
| Lysosome | pYNL-N1_LAMP1 (RDB13344) | pCNL-N1_LAMP1 (RDB13345) | pONL-N1_LAMP1 (RDB13346) | rat LAMP1 |
| Mitochondria | pYNL-N1_Mito (RDB13329) | pCNL-N1_Mito (RDB13330) | pONL-N1_Mito (RDB13331) | mitochondrial targeting sequence from subunit VIII of human cytochrome c oxdase |
| Nuclei | pYNL-N1_3xNLS (RDB13332) | pCNL-N1_3xNLS (RDB13333) | pONL-N1_3xNLS (RDB13334) | nuclear localization signal of SV40 |
| Nuclei in interphase | pYNL-C1_H2B (RDB13362) | pCNL-C1_H2B (RDB13363) | pONL-C1_H2B (RDB13364) | human histone H2B |
| Nucleoli | pYNL-C1_fibrillarin (RDB13368) | pCNL-C1_fibrillarin (RDB13369) | pONL-C1_fibrillarin (RDB13370) | human fibrillarin |
| Peroxisome | pYNL-C1_PTS1 (RDB13359) | pCNL-C1_PTS1 (RDB13360) | pONL-C1_PTS1 (RDB13361) | peroxisomal targeting signal 1 (tripeptide SKL) |
| Peroxisome | pYNL-N1_PTS2 (RDB13335) | pCNL-N1_PTS2 (RDB13336) | pONL-N1_PTS2 (RDB13337) | peroxisomal targeting signal 2 |
| Plasma membrane and endosomes | pYNL-C1_RhoB (RDB13356) | pCNL-C1_RhoB (RDB13357) | pONL-C1_RhoB (RDB13358) | human RhoB |
| Recycling endosomes | pYNL-C1_Rab11a (RDB13365) | pCNL-C1_Rab11a (RDB13366) | pONL-C1_Rab11a (RDB13367) | mouse Rab11a |
Reporter plasmid of wnt signaling
| Description | Yellow | Cyan | Orange |
|---|---|---|---|
| Wnt signal reporter of NLS-nano-lantern | pT2-7xTcf-NLS-YNL (RDB13371) | pT2-7xTcf-NLS-CNL (RDB13372) | pT2-7xTcf-NLS-ONL (RDB13373) |
| Wnt signal reporter of NLS-nano-lantern with protein degradation signal. | pT2-7xTcf-NLS-YNL-CP (RDB13374) | pT2-7xTcf-NLS-CNL-CP (RDB13375) | pT2-7xTcf-NLS-ONL-CP (RDB13376) |
| Wnt signal reporter of nano-lantern. | pT2-7xTcf-YNL (RDB13488) | pT2-7xTcf-CNL (RDB13489) | pT2-7xTcf-ONL (RDB13490) |
| Wnt signal reporter of nano-lantern with protein degradation signal. | pT2-7xTcf-YNL-CP (RDB13491) | pT2-7xTcf-CNL-CP (RDB13492) | pT2-7xTcf-ONL-CP (RDB13493) |
Lentiviral reporter plasmid of undifferenciated cell marker
| Name | Description | |
|---|---|---|
| Yellow | pRZ-mNanog-YNL (RDB13377) | Lentiviral reporter plasmid of mouse Nanog by the Yellow Nano-lantern. |
| Cyan | pRZ-mOct4-CNL (RDB13378) | Lentiviral reporter plasmid of mouse Oct4 by the Cyan Nano-lantern. |
| Orange | pGF-mSox2-ONL (RDB13379) | Lentiviral reporter plasmid of mouse Sox2 by the Orange Nano-lantern. |
(GRP0043j 2016.04.20 N.N.)
2023.05.06
